Onderzoek naar de rol van de Hippo signaalroute tijdens de menselijke pre- en peri-implantatie ontwikkeling onthult nieuwe inzichten in de segregatie van de vroege embryonale lijnen

Onderzoek naar de mechanismen die onderliggend zijn aan het falen van embryonale ontwikkeling
en implantatie bij de mens is belangrijk, aangezien 40-45% van de euploïde menselijke embryo's
niet ontwikkelt tot het blastocyststadium en 25-30% van de gevormde blastocysten niet implanteert.
We hebben het belang van de Hippo bij de segregatie in het embryo reeds onderzocht. Belangrijke
aspecten blijven echter onduidelijk, zoals de onderscheidende rol van canoniek versus niet-canoniek
Hippo-signaal en de rol van de Hippo-signaal-onafhankelijke factor - VGLL4. Ik stel de hypothese
voor dat canoniek Hippo de hoofdregulator is van de segregatie van de embryonale lijnen, waarbij
VGLL4 de transcriptionele output van de route reguleert via competitieve interactie met de Hippoeffectoren. Op deze manier controleert de Hippo-signaalroute de differentiatie in de verschillende
embryonale lijnen. Mijn doel is om canoniek Hippo-signalen en de rol van VGLL4 functioneel te
karakteriseren door farmacologische inhibitie van de belangrijkste kinasen en door genetische
targeting met behulp van CRISPR-Cas9, respectievelijk. Effecten zullen worden onderzocht op de
morfologie en de ontwikkelingskinetiek van embryo’s en de expressie van lijn-specifieke markers/
Hippo geassocieerde genen via immunofluorescentiebeeldvorming en single-cell RNA-seq. De mogelijkheid van embryo's om zich aan te hechten en te implanteren zal worden onderzocht door
gebruik te maken van endometriale klierorganoiden.